植物学报 ›› 2018, Vol. 53 ›› Issue (4): 468-476.DOI: 10.11983/CBB17250
马路, 方媛, 肖飒清, 周纯, 金哲伦, 叶雯澜, 饶玉春*()
收稿日期:
2017-12-18
接受日期:
2018-02-22
出版日期:
2018-07-01
发布日期:
2018-09-11
通讯作者:
饶玉春
作者简介:
共同第一作者。
基金资助:
Ma Lu, Fang Yuan, Xiao Saqing, Zhou Chun, Jin Zhelun, Ye Wenlan, Rao Yuchun*()
Received:
2017-12-18
Accepted:
2018-02-22
Online:
2018-07-01
Published:
2018-09-11
Contact:
Rao Yuchun
About author:
These authors contributed equally to this paper
摘要: 条斑病是水稻(Oryza sativa)中的常见病害, 已经对我国粮食的高产稳产造成严重威胁。以典型籼稻台中本地1号与粳稻春江06的杂交F1代花药培养双单倍体群体(DH)为材料, 用Xoc BLS256进行人工接菌, 对双亲及群体各株系的病斑长度进行测量和量化分析; 同时利用该群体业已构建的加密遗传图谱对病斑表型数据进行QTL作图分析。结果在水稻第2、4、5和8号染色体上共检测到4个效应值能区分开的QTL。对2号与5号染色体上2个较大的QTL区间内抗条斑病相关基因进行了表达分析, 结果表明这些基因在处理前后出现了不同程度的表达差异, 暗示这些基因可能是响应春江06与台中本地1号条斑病抗性差异的目标基因。研究结果为进一步克隆水稻条斑病抗性QTL奠定了重要基础。
马路, 方媛, 肖飒清, 周纯, 金哲伦, 叶雯澜, 饶玉春. 水稻条斑病抗性QTL的挖掘及相关基因的表达. 植物学报, 2018, 53(4): 468-476.
Ma Lu, Fang Yuan, Xiao Saqing, Zhou Chun, Jin Zhelun, Ye Wenlan, Rao Yuchun. QTL Exploration of Bacterial Leaf Streak and Their Gene Expression in Rice. Chinese Bulletin of Botany, 2018, 53(4): 468-476.
Marker | Forward primer (5′-3′) | Reverse primer (5′-3′) |
---|---|---|
OsActin1 | TGGCATCTCTCAGCACATTCC | TGCACAATGGATGGGTCAGA |
LOC_Os02g10580 | GGAGAGAGGCATCGTCAGTC | GCCGGAGGAGTAACCAAACA |
LOC_Os02g11760 | GACGGTCTTCCTGCGTACAA | CGAGCTCCGCAAATCCATTG |
LOC_Os02g16250 | GTACGGACAGAAGCCCATCAA | CACCCCTTCGAGCTACTGC |
LOC_Os02g16540 | GTACGGACAGAAGCCCATCAA | CACCCCTTCGAGCTACTGC |
LOC_Os02g17190 | CTGGAGCAACATCTGGCGAA | TATGGGCAACCTGAAGGAGG |
LOC_Os02g18000 | CGGGACATTGGAACCCTTCA | CAATGCGTCGTGTGATGGTC |
LOC_Os02g18510 | CCCTATGCTTCGACGGGTTT | GAGACCCACCAGTTTGTCGT |
LOC_Os05g44400 | TGTGCGAGCCGTATGAACAA | AAGGTCTCCTCGCCCATGTA |
表1 实时荧光定量PCR的引物序列
Table 1 Primer sequences of quantitative real-time fluorescent PCR
Marker | Forward primer (5′-3′) | Reverse primer (5′-3′) |
---|---|---|
OsActin1 | TGGCATCTCTCAGCACATTCC | TGCACAATGGATGGGTCAGA |
LOC_Os02g10580 | GGAGAGAGGCATCGTCAGTC | GCCGGAGGAGTAACCAAACA |
LOC_Os02g11760 | GACGGTCTTCCTGCGTACAA | CGAGCTCCGCAAATCCATTG |
LOC_Os02g16250 | GTACGGACAGAAGCCCATCAA | CACCCCTTCGAGCTACTGC |
LOC_Os02g16540 | GTACGGACAGAAGCCCATCAA | CACCCCTTCGAGCTACTGC |
LOC_Os02g17190 | CTGGAGCAACATCTGGCGAA | TATGGGCAACCTGAAGGAGG |
LOC_Os02g18000 | CGGGACATTGGAACCCTTCA | CAATGCGTCGTGTGATGGTC |
LOC_Os02g18510 | CCCTATGCTTCGACGGGTTT | GAGACCCACCAGTTTGTCGT |
LOC_Os05g44400 | TGTGCGAGCCGTATGAACAA | AAGGTCTCCTCGCCCATGTA |
Chromosome No. | QTL position (cM) | Marker interval | LOD score | Variation explained (%) | Additive effect | Dominant |
---|---|---|---|---|---|---|
2 | 41.5 | RM145-RM521 | 3.1272 | 19.2549 | -0.1729 | 2.6315 |
4 | 80 | RM252-RM241 | 2.3362 | 10.1937 | -0.3362 | 1.3523 |
5 | 106.6 | RM6972-RM3321 | 2.4984 | 18.0963 | 0.18 | -1.5646 |
8 | 11.5 | RM6925-RM1235 | 2.5792 | 14.6327 | -0.4059 | -2.0904 |
表2 水稻二倍体(DH)群体中抗条斑病的QTL区间统计
Table 2 QTL interval statistics of resistance to bacterial leaf streak in rice double haploid (DH) population
Chromosome No. | QTL position (cM) | Marker interval | LOD score | Variation explained (%) | Additive effect | Dominant |
---|---|---|---|---|---|---|
2 | 41.5 | RM145-RM521 | 3.1272 | 19.2549 | -0.1729 | 2.6315 |
4 | 80 | RM252-RM241 | 2.3362 | 10.1937 | -0.3362 | 1.3523 |
5 | 106.6 | RM6972-RM3321 | 2.4984 | 18.0963 | 0.18 | -1.5646 |
8 | 11.5 | RM6925-RM1235 | 2.5792 | 14.6327 | -0.4059 | -2.0904 |
Gene ID | Putative function | Gene ID | Putative function |
---|---|---|---|
LOC_Os02g10370 | hrpN-interacting protein from Malus | LOC_Os02g17150 | OsSub18-putative subtilisin homologue |
LOC_Os02g11760 | Pleiotropic drug resistance protein | LOC_Os02g17190 | MYB family transcription factor |
LOC_Os02g13890 | FYVE zinc finger domain containing protein | LOC_Os02g17990 | Leucine rich repeat family protein |
LOC_Os02g15160 | OsFBX40-F-box domain containing protein | LOC_Os02g18000 | Disease resistance protein RGA2 |
LOC_Os02g15280 | VQ domain containing protein | LOC_Os02g18140 | NBS type disease resistance protein |
LOC_Os02g15594 | Protein phosphatase 2C | LOC_Os02g18410 | Salt stress root protein RS1 |
LOC_Os02g15870 | Molybdenu cofactor biosynthesis protein 1 | LOC_Os02g18510 | Stripe rust resistance protein Yr10 |
LOC_Os02g16070 | Lr1 disease resistance protein | LOC_Os05g43820 | Ras-related protein |
LOC_Os02g16540 | WRKY transcription factor | LOC_Os05g44550 | Zinc finger family protein |
LOC_Os02g16680 | BZIP transcription factor | LOC_Os05g44770 | Receptor-like protein kinase 5 precursor |
表3 检测到的QTL区间内的候选基因
Table 3 Candidate gene in the detected QTL interval
Gene ID | Putative function | Gene ID | Putative function |
---|---|---|---|
LOC_Os02g10370 | hrpN-interacting protein from Malus | LOC_Os02g17150 | OsSub18-putative subtilisin homologue |
LOC_Os02g11760 | Pleiotropic drug resistance protein | LOC_Os02g17190 | MYB family transcription factor |
LOC_Os02g13890 | FYVE zinc finger domain containing protein | LOC_Os02g17990 | Leucine rich repeat family protein |
LOC_Os02g15160 | OsFBX40-F-box domain containing protein | LOC_Os02g18000 | Disease resistance protein RGA2 |
LOC_Os02g15280 | VQ domain containing protein | LOC_Os02g18140 | NBS type disease resistance protein |
LOC_Os02g15594 | Protein phosphatase 2C | LOC_Os02g18410 | Salt stress root protein RS1 |
LOC_Os02g15870 | Molybdenu cofactor biosynthesis protein 1 | LOC_Os02g18510 | Stripe rust resistance protein Yr10 |
LOC_Os02g16070 | Lr1 disease resistance protein | LOC_Os05g43820 | Ras-related protein |
LOC_Os02g16540 | WRKY transcription factor | LOC_Os05g44550 | Zinc finger family protein |
LOC_Os02g16680 | BZIP transcription factor | LOC_Os05g44770 | Receptor-like protein kinase 5 precursor |
图4 抗条斑病相关基因的表达TN1-C和CJ06-C代表接种过细菌性条斑病病菌。不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。
Figure 4 Expression of genes resistant to bacterial leaf streakTN1-C and CJ06-C represent after inoculated bacterial leaf streak. Different lowercase letters indicate significant differences (P<0.05).
Traits | Chr. No. | Materials | Marker interval | LOD score | Reference |
---|---|---|---|---|---|
Blast resistance | 2 | Double haploid population of ZYQ8/ JX17 | CT87-G1234 | 5.11 | Xu et al., 2004 (in Chinese) |
Grain density | 2 | F3 population derived from the cross of TY319 and 8B | RM12729-RM324 | 3.33 | Han et al., 2017 (in Chinese) |
Spike grain number | 2 | F3 population derived from the cross of TY319 and 8B | RM12729-RM324 | 4.74 | Han et al., 2017 (in Chinese) |
Bacterial blight resistance | 4 | Lemont/Teqing cross introgression lines (ILs) | RM119-RM252 | 3.56 | Zhou et al., 2012 |
表4 候选区域内已报道的抗性QTL
Table 4 Resistant QTL reported in the candidate region
Traits | Chr. No. | Materials | Marker interval | LOD score | Reference |
---|---|---|---|---|---|
Blast resistance | 2 | Double haploid population of ZYQ8/ JX17 | CT87-G1234 | 5.11 | Xu et al., 2004 (in Chinese) |
Grain density | 2 | F3 population derived from the cross of TY319 and 8B | RM12729-RM324 | 3.33 | Han et al., 2017 (in Chinese) |
Spike grain number | 2 | F3 population derived from the cross of TY319 and 8B | RM12729-RM324 | 4.74 | Han et al., 2017 (in Chinese) |
Bacterial blight resistance | 4 | Lemont/Teqing cross introgression lines (ILs) | RM119-RM252 | 3.56 | Zhou et al., 2012 |
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