Establishment of Callus Induction and Regeneration System of Anemone silvestris

doi:10.11983/CBB21200

Abstract

Abstract: In order to establish the tissue culture and regeneration system of wild Anemone silvestris, we investigated effects of different concentrations of plant growth regulators on callus induction, adventitious bud differentiation, proliferation and rooting of different explants including epicotyl, hypocotyl, leaf and petiole. The results showed that adventitious buds could be induced in all four explants, among them the epicotyl was the best. The best medium for hypocotyl induction was 1/2MS+2.0 mg∙L^-1 6-BA+0.1 mg∙L^-1 NAA with the highest induction rate of 86.67%; The optimal medium for proliferation was as follow 1/2MS+1.0 mg∙L^-1 6-BA+0.05 mg∙L^-1 NAA, and the proliferation coefficient was 3.67; The optimal rooting medium was 1/2MS+0.3 mg∙L^-1 IBA with the rooting rate of 100%; In the medium of peat:vermiculite = 2:1 (v/v), the survival rate of tissue culture seedling was at 98.33%. This study effectively solved the shortage of germplasm resources of A. silvestris in garden and medicinal production, and provided technical support for the realization of factory seedling cultivation.

Key words: Anemone silvestris, callus, plant regeneration, tissue culture

Jinchun Lu, Lina Cao, Guanjie Tong, Xinying Wang, Liying Zhang, Xin Yu, Huifang Li, Yanhui Li. Establishment of Callus Induction and Regeneration System of Anemone silvestris[J]. Chinese Bulletin of Botany, 2022, 57(2): 217-226.

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https://www.chinbullbotany.com/EN/Y2022/V57/I2/217

Figures/Tables 9

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No.	6-BA (mg∙L^-1)	NAA (mg∙L^-1)	Callus induction rate (%)	Growth condition
1	0	0	0.00±0.00 f	-
2	0.5	0.1	56.67±7.26 c	++
3	0.5	0.2	60.00±8.66 bc	++
4	0.5	0.5	23.33±3.33 def	+
5	0.5	1.0	0.00±0.00 f	-
6	1.0	0.1	86.67±7.26 ab	+++++
7	1.0	0.2	55.00±5.77 c	+++
8	1.0	0.5	20.00±2.89 ef	++
9	1.0	1.0	0.00±0.00 f	-
10	2.0	0.1	96.67±1.67 a	++++
11	2.0	0.2	51.67±8.82 cd	+++
12	2.0	0.5	41.67±8.82 cde	+++
13	2.0	1.0	33.33±4.41 cde	++

No.	6-BA (mg∙L^-1)	NAA (mg∙L^-1)	Callus induction rate (%)	Growth condition
1	0	0	0.00±0.00 f	-
2	0.5	0.1	56.67±7.26 c	++
3	0.5	0.2	60.00±8.66 bc	++
4	0.5	0.5	23.33±3.33 def	+
5	0.5	1.0	0.00±0.00 f	-
6	1.0	0.1	86.67±7.26 ab	+++++
7	1.0	0.2	55.00±5.77 c	+++
8	1.0	0.5	20.00±2.89 ef	++
9	1.0	1.0	0.00±0.00 f	-
10	2.0	0.1	96.67±1.67 a	++++
11	2.0	0.2	51.67±8.82 cd	+++
12	2.0	0.5	41.67±8.82 cde	+++
13	2.0	1.0	33.33±4.41 cde	++

No.	6-BA (mg∙L^-1)	NAA (mg∙L^-1)	Callus induction rate (%)	Budding rate (%)	Growth condition
1	0	0	0.00±0.00 d	0.00±0.00 f	-
2	0.5	0.1	86.67±6.01 ab	43.57±5.17 bc	++
3	0.5	0.2	93.33±4.41 ab	28.49±4.05 cd	+
4	0.5	0.5	71.67±4.41 bc	0.00±0.00 f	-
5	0.5	1.0	55.00±5.77 c	0.00±0.00 f	-
6	1.0	0.1	76.67±10.14 abc	0.00±0.00 f	-
7	1.0	0.2	83.33±4.41 ab	26.21±5.38 de	+
8	1.0	0.5	96.67±1.67 a	10.26±2.81 ef	+++
9	1.0	1.0	88.33±6.01 ab	0.00±0.00 f	-
10	2.0	0.1	100.00±0.00 a	76.67±4.41 a	++++
11	2.0	0.2	100.00±0.00 a	53.33±6.01 b	+++
12	2.0	0.5	93.33±4.41 ab	30.42±3.45 cd	++
13	2.0	1.0	100.00±0.00 a	0.00±0.00 f	-

No.	6-BA (mg∙L^-1)	NAA (mg∙L^-1)	Callus induction rate (%)	Budding rate (%)	Growth condition
1	0	0	0.00±0.00 d	0.00±0.00 f	-
2	0.5	0.1	86.67±6.01 ab	43.57±5.17 bc	++
3	0.5	0.2	93.33±4.41 ab	28.49±4.05 cd	+
4	0.5	0.5	71.67±4.41 bc	0.00±0.00 f	-
5	0.5	1.0	55.00±5.77 c	0.00±0.00 f	-
6	1.0	0.1	76.67±10.14 abc	0.00±0.00 f	-
7	1.0	0.2	83.33±4.41 ab	26.21±5.38 de	+
8	1.0	0.5	96.67±1.67 a	10.26±2.81 ef	+++
9	1.0	1.0	88.33±6.01 ab	0.00±0.00 f	-
10	2.0	0.1	100.00±0.00 a	76.67±4.41 a	++++
11	2.0	0.2	100.00±0.00 a	53.33±6.01 b	+++
12	2.0	0.5	93.33±4.41 ab	30.42±3.45 cd	++
13	2.0	1.0	100.00±0.00 a	0.00±0.00 f	-

No.	6-BA (mg∙L^-1)	NAA (mg∙L^-1)	Callus induction rate (%)		Growth condition
No.	6-BA (mg∙L^-1)	NAA (mg∙L^-1)	Leaf	Petiole	Leaf	Petiole
1	0	0	0.00±0.00 d	0.00±0.00 e	-	-
2	0.5	0.1	90.00±5.77 ab	93.33±3.33 abc	+	+
3	1.0	0.1	96.67±3.33 a	96.67±3.33 ab	++	+
4	2.0	0.1	100.00±0.00 a	100.00±0.00 a	+++++	+++++
5	4.0	0.1	80.00±5.77 bc	83.33±3.33 bcd	+	++
6	0.5	0.3	76.67±3.33 bc	80.00±5.77 cd	+++	++
7	1.0	0.3	80.00±0.00 bc	76.67±3.33 d	++	++
8	2.0	0.3	73.33±3.33 c	73.33±3.33 d	+++	+
9	4.0	0.3	76.67±3.33 bc	80.00±0.00 cd	+++	++
10	0.5	0.5	80.00±0.00 bc	73.33±3.33 d	++	+++
11	1.0	0.5	80.00±0.00 bc	80.00±0.00 cd	+++	++++
12	2.0	0.5	96.67±3.33 a	93.33±3.33 abc	++	+++
13	4.0	0.5	100.00±0.00 a	100.00±0.00 a	++++	+++