图/表详细信息

发根农杆菌介导的野葛毛状根遗传转化体系

曾文丹, 严华兵, 吴正丹, 尚小红, 曹升, 陆柳英, 肖亮, 施平丽, 程冬, 龙紫媛, 李婕宇

植物学报 2025, 60 (3): 425-434. DOI: 10.11983/CBB24092

摘要（197）

HTML （3）

PDF（pc）（12911KB）（230）

为建立高效的野葛(Pueraria lobata)毛状根遗传转化体系, 以野葛组培苗为外植体, 探讨不同因素对野葛毛状根遗传转化效率的影响。结果表明, 基因型是建立野葛毛状根高效遗传转化体系的主要限制因子; 发根农杆菌K599为最适宜的菌株; 以培养5-13代组培苗继代培养8天、第1-2节位刚展开的幼嫩叶片为最佳外植体材料, 预培养3天, 菌液侵染15分钟, 毛状根诱导率最高, 可达22.4%。野葛毛状根继代增殖的最佳培养基类型为固体培养基, 其毛状根鲜重是液体培养基中毛状根鲜重的75倍; PCR检测和荧光显微观察结果显示, GFP及rolB基因在野葛毛状根基因组中稳定表达, 共转化率为80%。研究初步建立了发根农杆菌介导的野葛毛状根遗传转化体系, 旨在为野葛基因功能研究奠定基础。

Culture days (d)	Rooting time (d)	Hairy root frequency (%)	Hairy root density
5	11	14.7±4.5 bc	2.0±0 a
8	10	22.4±3.7 a	1.9±0.5 a
11	11	16.4±3.5 b	1.6±0.3 ab
14	13	12.0±2.5 c	1.0±0 b
17	14	6.1±3.1 d	1.0±0 b
20	-	0 e	-
23	-	0 e	-
26	-	0 e	-
29	-	0 e	-

View table in article

表7 不同培养天数对野葛毛状根诱导效率的影响

正文中引用本图/表的段落

不同继代培养天数的野葛组培苗幼嫩叶片其毛状根诱导效率具有显著差异(表7), 即苗龄是影响野葛毛状根诱导的重要因素之一。随着继代培养天数的增加, 诱导率呈现先升高后降低趋势, 培养天数大于20天的组培苗无法成功诱导野葛毛状根; 诱导密度呈现降低趋势。培养5天的组培苗幼嫩叶片的诱导密度最高(为2.0); 随着培养天数的推移, 野葛毛状根的出根时间也随之延迟。当组培苗继代培养8天时, 幼嫩叶片诱导率最高(为22.4%), 诱导密度也较高。因此, 以继代培养8天的组培苗幼嫩叶片为最佳外植体材料。

本文的其它图/表