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北美豆梨杂种幼胚挽救及再生体系的建立
刘玉泽, 王一菲, 任威蓁, 栗浩, 路斌, 路丙社, 于晓跃
植物学报    2024, 59 (5): 800-809.   DOI: 10.11983/CBB23152
摘要   (332 HTML34 PDF(pc) (9665KB)(250)  

以北美豆梨(Pyrus calleryana cv. ‘Cleveland’)杂种幼胚为材料, 系统开展了杂种幼胚灭菌、愈伤组织诱导、不定芽增殖和生根培养基的筛选研究。结果表明, 4°C低温贮藏21天的杂种幼胚萌发率最高, 为67.23%; 幼胚最佳灭菌处理为75%乙醇灭菌30秒, 10% H2O2和0.1% HgCl2分别消毒10和14分钟; 最适幼胚萌发培养基为1/2MS+4.0 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 NAA, 萌发率达89.67%; 最适愈伤组织诱导培养基为1/2MS+1.0 mg·L-1 IBA+1.0 mg·L-1 6-BA, 愈伤组织诱导率为93.33%; 最佳分化培养基为1/2MS+0.2 mg·L-1 IBA+2.0 mg·L-1 6-BA, 再生频率为87.44%; 最佳继代增殖培养基为1/2MS+1.5 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 IBA, 增殖率为100%; 最佳生根培养基为1/2MS+20 g·L-1蔗糖+1.0 g·L-1 活性炭+1.5 mg·L-1 IBA+0.05 mg·L-1 NAA, 生根率为82.63%。该研究为北美豆梨杂交种质资源高效繁殖提供了科学依据和指导。


No. 6-BA (mg·L-1) IBA (mg·L-1) Multiplication
rates (%)
Multiplication
coefficient
Growth condition
C1 1.0 0.05 91.11±0.96 d 3.17±0.17 efg Average, short
C2 1.0 0.1 87.22±0.96 e 3.00±0.44 fg Average, short
C3 1.0 0.2 95.00±1.67 c 2.89±0.10 g Average
C4 1.5 0.05 100.00±0.00 a 4.17±0.44 bc Stronger
C5 1.5 0.1 100.00±0.00 a 5.22±0.35 a Stronger, large leaf blade, dark green
C6 1.5 0.2 100.00±0.00 a 4.11±0.10 bcd Stronger, dark green
C7 2.0 0.05 100.00±0.00 a 3.67±0.17 cde Stronger, dark green
C8 2.0 0.1 100.00±0.00 a 4.50±0.33 b Stronger
C9 2.0 0.2 100.00±0.00 a 3.61±0.19 cdef Stronger
C10 3.0 0.05 95.56±0.96 c 3.61±0.69 cdef Average growth, small leaf blade
C11 3.0 0.1 97.22±0.96 b 3.50±0.44 defg Average growth, small leaf blade
C12 3.0 0.2 100.00±0.00 a 3.28±0.19 efg Average growth, dwarf tufted bud, deformed seedling
C13 4.0 0.05 96.11±0.96 bc 3.94±0.35 bcd Weak growth, fewer leaves, red stems and leaves, glass seedlings
C14 4.0 0.1 92.22±0.96 d 3.67±0.29 cde Small leaf blade, dwarf tufted bud, glass seedlings, deformed seedling
C15 4.0 0.2 100.00±0.00 a 3.56±0.19 cdef Malformed leaf, glass seedlings
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表6 不同植物生长调节物质组合对不定芽增殖的影响
正文中引用本图/表的段落
C1-C15分别代表不同处理的编号。6-BA和IBA同表2
不同配比的植物生长调节物质对不定芽增殖的影响见表6。不同浓度的6-BA和IBA对不定芽增殖率、平均增殖系数和不定芽生长状况均有影响。当6-BA浓度为1.5-2.0 mg·L-1且IBA浓度为0.05-0.2 mg·L-1时, 不定芽的增殖率为100%。除C4和C5外, 其它各组当6-BA浓度一定时, 增殖系数随IBA浓度的增大而减小; 当IBA浓度一定且6-BA浓度为1.0-2.5 mg·L-1时, 增殖系数随6-BA浓度的增加呈先上升后下降趋势。6-BA浓度为1.0 mg·L-1时, 不定芽长势一般, 丛生芽矮小, 出现莲座化(图3A); 6-BA浓度为3.0 mg·L-1时, 组培苗出现玻璃化, 且茎纤细, 叶片小; 6-BA浓度为4.0 mg·L-1时, 不定芽长势羸弱, 叶片卷曲变红, 产生基部膨大变红的畸形苗和玻璃化苗(图3D); 6-BA浓度为1.5和2.0 mg·L-1时, 不定芽长势健壮, 叶片正常且颜色浓绿(图3B, C)。由此可知, 6-BA浓度过低, 组培苗增殖系数低, 易出现莲座化; 浓度过高, 易出现玻璃化, 生成过多的无效茎。C5为不定芽的最佳增殖培养基, 即1/2MS+1.5 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 IBA, 增殖率为100%, 增殖系数高达5.22, 且诱导的丛生芽长势健壮, 颜色浓绿。
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