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北美豆梨杂种幼胚挽救及再生体系的建立
植物学报
2024, 59 (5):
800-809.
DOI: 10.11983/CBB23152
以北美豆梨(Pyrus calleryana cv. ‘Cleveland’)杂种幼胚为材料, 系统开展了杂种幼胚灭菌、愈伤组织诱导、不定芽增殖和生根培养基的筛选研究。结果表明, 4°C低温贮藏21天的杂种幼胚萌发率最高, 为67.23%; 幼胚最佳灭菌处理为75%乙醇灭菌30秒, 10% H2O2和0.1% HgCl2分别消毒10和14分钟; 最适幼胚萌发培养基为1/2MS+4.0 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 NAA, 萌发率达89.67%; 最适愈伤组织诱导培养基为1/2MS+1.0 mg·L-1 IBA+1.0 mg·L-1 6-BA, 愈伤组织诱导率为93.33%; 最佳分化培养基为1/2MS+0.2 mg·L-1 IBA+2.0 mg·L-1 6-BA, 再生频率为87.44%; 最佳继代增殖培养基为1/2MS+1.5 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 IBA, 增殖率为100%; 最佳生根培养基为1/2MS+20 g·L-1蔗糖+1.0 g·L-1 活性炭+1.5 mg·L-1 IBA+0.05 mg·L-1 NAA, 生根率为82.63%。该研究为北美豆梨杂交种质资源高效繁殖提供了科学依据和指导。  View image in article
图1
不同处理对北美豆梨杂种幼胚灭菌及萌发率的影响
(A) 不同灭菌处理对幼胚污染率与成活率的影响; (B) 不同低温贮藏时间对幼胚萌发率的影响。不同小写字母表示各处理间差异显著(P<0.05)。A1-A10同
正文中引用本图/表的段落
不同灭菌处理条件下, 杂种幼胚污染率和成活率差异显著(图1A)。仅用升汞消毒时(A1-A6), 污染率随时间的延长而降低; 成活率随处理时间的延长先升高后降低。A9处理的污染率为11.11%, 与A5、A6和A10处理无显著差异, 但其成活率可达81.11%, 显著高于其它处理。因此, 杂种幼胚的最佳灭菌处理为A9 (75%乙醇灭菌(30秒)+10% H2O2处理(10分钟)+0.1% HgCl2处理(14分钟))。
未经低温处理的杂种幼胚接种6天后由白色变为黄绿色, 8-9天胚芽开始萌发。经低温处理的幼胚接种3-4天后转绿, 胚芽开始萌发。随着低温处理时间的延长, 种胚萌发率不断升高, 至21天时萌发率最高, 达到67.23%, 低温处理28天与21天的种胚萌发率差异不显著, 低温贮藏21天和28天的幼胚萌发率显著高于其它处理, 说明北美豆梨种子在4°C下贮藏21天, 能最大程度地提高幼胚的萌发率(图1B)。研究结果表明, 一定时间的低温处理能促进杂种幼胚萌发, 且胚培苗生长健壮, 侧根发达, 叶片多且浓绿。
本文的其它图/表
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