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北美豆梨杂种幼胚挽救及再生体系的建立

刘玉泽, 王一菲, 任威蓁, 栗浩, 路斌, 路丙社, 于晓跃

植物学报 2024, 59 (5): 800-809. DOI: 10.11983/CBB23152

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以北美豆梨(Pyrus calleryana cv. ‘Cleveland’)杂种幼胚为材料, 系统开展了杂种幼胚灭菌、愈伤组织诱导、不定芽增殖和生根培养基的筛选研究。结果表明, 4°C低温贮藏21天的杂种幼胚萌发率最高, 为67.23%; 幼胚最佳灭菌处理为75%乙醇灭菌30秒, 10% H₂O₂和0.1% HgCl₂分别消毒10和14分钟; 最适幼胚萌发培养基为1/2MS+4.0 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1 NAA, 萌发率达89.67%; 最适愈伤组织诱导培养基为1/2MS+1.0 mg·L^-1 IBA+1.0 mg·L^-1 6-BA, 愈伤组织诱导率为93.33%; 最佳分化培养基为1/2MS+0.2 mg·L^-1 IBA+2.0 mg·L^-1 6-BA, 再生频率为87.44%; 最佳继代增殖培养基为1/2MS+1.5 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 IBA, 增殖率为100%; 最佳生根培养基为1/2MS+20 g·L^-1蔗糖+1.0 g·L^-1 活性炭+1.5 mg·L^-1 IBA+0.05 mg·L^-1 NAA, 生根率为82.63%。该研究为北美豆梨杂交种质资源高效繁殖提供了科学依据和指导。

No.	Callus rate (%)	Differentiation rate (%)	Number of adventitious buds regenerated	Callus form
B1	60.56±2.55 e	77.22±2.55 c	3.27±0.04 b	Yellowish green, white, sticky lump
B2	66.11±2.55 d	72.78±2.55 d	2.79±0.04 c	Yellowish green, white, loose
B3	74.44±2.55 c	70.56±1.92 d	2.86±0.03 c	Light green, white, ropy
B4	72.22±2.55 c	89.44±1.92 a	3.79±0.06 a	Light green, loose
B5	85.56±1.92 b	82.78±1.92 b	3.86±0.03 a	Chartreuse, white, ropy
B6	93.33±1.67 a	63.89±1.92 e	2.67±0.03 d	Chartreuse, white, ropy
B7	82.78±2.55 b	81.67±2.89 b	3.59±0.04 b	Yellow, white, clumpy and compact
B8	86.67±3.33 b	60.56±1.92 e	2.69±0.05 d	Light yellow, granular sphericity, compact and fragile
B9	91.67±2.89 a	61.67±1.67 e	2.38±0.04 e	Light yellow, white, waterlogged callus

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表5 不同配比植物生长调节物质对杂种幼胚组织初代培养的影响

正文中引用本图/表的段落

不同配比的植物生长调节物质对杂种幼胚组织初代培养的影响见表5。不同配比植物生长调节物质均可诱导幼胚产生愈伤组织, 不同处理诱导的愈伤组织颜色、质地和愈伤组织量有明显区别, 出愈率范围为60.56%-93.33%, 差异显著, 其中B6的出愈率最高。B7-B9愈伤组织体积较大, 数量多, 颜色偏浅, 呈现团状紧密的形态, 但质量较差, 易碎。B1-B6愈伤组织多呈现黄绿色和浅绿色, 质地偏疏松黏稠, 体积较B7-B9中的愈伤组织小。部分愈伤组织在转为光培养后边缘出现红色。不同处理产生愈伤组织的时间存在差异, 一般需要3-7天。B7出愈时间最短, B6出愈时间最长。2,4-D能够较快诱导出愈伤组织, 但浓度过高或过低时愈伤组织质地松散, 易出现水渍。

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