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北美豆梨杂种幼胚挽救及再生体系的建立

刘玉泽, 王一菲, 任威蓁, 栗浩, 路斌, 路丙社, 于晓跃

植物学报 2024, 59 (5): 800-809. DOI: 10.11983/CBB23152

摘要（332）

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以北美豆梨(Pyrus calleryana cv. ‘Cleveland’)杂种幼胚为材料, 系统开展了杂种幼胚灭菌、愈伤组织诱导、不定芽增殖和生根培养基的筛选研究。结果表明, 4°C低温贮藏21天的杂种幼胚萌发率最高, 为67.23%; 幼胚最佳灭菌处理为75%乙醇灭菌30秒, 10% H₂O₂和0.1% HgCl₂分别消毒10和14分钟; 最适幼胚萌发培养基为1/2MS+4.0 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1 NAA, 萌发率达89.67%; 最适愈伤组织诱导培养基为1/2MS+1.0 mg·L^-1 IBA+1.0 mg·L^-1 6-BA, 愈伤组织诱导率为93.33%; 最佳分化培养基为1/2MS+0.2 mg·L^-1 IBA+2.0 mg·L^-1 6-BA, 再生频率为87.44%; 最佳继代增殖培养基为1/2MS+1.5 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 IBA, 增殖率为100%; 最佳生根培养基为1/2MS+20 g·L^-1蔗糖+1.0 g·L^-1 活性炭+1.5 mg·L^-1 IBA+0.05 mg·L^-1 NAA, 生根率为82.63%。该研究为北美豆梨杂交种质资源高效繁殖提供了科学依据和指导。

No.	Basic media	NAA (mg·L^-1)	Sugar (mg·L^-1)	AC (g·L^-1)	IBA (mg·L^-1)
D1	1/2MS	0.05	20	0	1.0
D2	1/2MS	0.05	20	1.0	1.5
D3	1/2MS	0.05	20	1.5	2.0
D4	1/2MS	0.05	25	0	1.5
D5	1/2MS	0.05	25	1.0	1.0
D6	1/2MS	0.05	25	1.5	2.0
D7	1/2MS	0.05	30	0	2.0
D8	1/2MS	0.05	30	1.0	1.0
D9	1/2MS	0.05	30	1.5	1.5

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表4 生根培养实验方案

正文中引用本图/表的段落

通讯作者:*于晓跃, 博士, 讲师, 硕士生导师。主要从事杨树抗虫研究和转录因子功能鉴定研究。以第一作者身份在Industrial Crops and Products和BMC Plant Biology等权威期刊上发表论文4余篇, 以合作者身份发表SCI论文10余篇。主持河北省自然科学基金项目1项, 并参与国家自然科学基金等科研项目。E-mail:yuxiaoyuelb@163.com

摘要：以北美豆梨(Pyrus calleryana cv. ‘Cleveland’)杂种幼胚为材料, 系统开展了杂种幼胚灭菌、愈伤组织诱导、不定芽增殖和生根培养基的筛选研究。结果表明, 4°C低温贮藏21天的杂种幼胚萌发率最高, 为67.23%; 幼胚最佳灭菌处理为75%乙醇灭菌30秒, 10% H₂O₂和0.1% HgCl₂分别消毒10和14分钟; 最适幼胚萌发培养基为1/2MS+4.0 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 NAA, 萌发率达89.67%; 最适愈伤组织诱导培养基为1/2MS+1.0 mg·L-1 IBA+1.0 mg·L-1 6-BA, 愈伤组织诱导率为93.33%; 最佳分化培养基为1/2MS+0.2 mg·L-1 IBA+2.0 mg·L-1 6-BA, 再生频率为87.44%; 最佳继代增殖培养基为1/2MS+1.5 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 IBA, 增殖率为100%; 最佳生根培养基为1/2MS+20 g·L-1蔗糖+1.0 g·L-1 活性炭+1.5 mg·L-1 IBA+0.05 mg·L-1 NAA, 生根率为82.63%。该研究为北美豆梨杂交种质资源高效繁殖提供了科学依据和指导。

选用1/2MS培养基, 添加0.05 mg·L-1 NAA, 及不同浓度的蔗糖、活性炭(active carbon, AC)和IBA (表4)。将高度在2 cm以上的健壮不定芽接种至培养基中诱导生根。每瓶接种4个不定芽, 每处理10瓶, 重复3次。30天后统计生根率、最大根长和平均生根数。

表中数据为平均值±标准差。同列不同小写字母表示各处理间差异显著(P<0.05)。IBA同表2。D1-D9同表4。

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