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银扇草再生体系的建立

曾浩, 李佩芳, 郭至辉, 刘春林, 阮颖

植物学报 2024, 59 (3): 433-440. DOI: 10.11983/CBB23094

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为建立银扇草(Lunaria annua)体外再生体系, 以其真叶为外植体, 探讨消毒条件、植物生长调节剂组合及浓度对愈伤组织诱导、不定芽和不定根分化的影响; 进一步分析了生根方式对成苗和幼苗生长的影响。结果表明, 用75%乙醇消毒45秒配合0.1%升汞溶液消毒6分钟为银扇草叶片外植体最佳消毒处理; 真叶愈伤组织诱导及不定芽分化的最适培养基为MS+0.5 mg∙L^-16-BA+2.0 mg∙L^-1 2,4-D, 愈伤组织诱导率达93.37%, 不定芽分化率达84.08%; 最佳生根培养基为MS+ 0.1 mg∙L^-1NAA, 从接种叶片外植体到获得再生植株约90天。该研究建立了银扇草稳定的再生体系, 为开发利用银扇草资源及挖掘功能基因奠定了基础。

Number	6-BA (mg∙L^-1)	2,4-D (mg∙L^-1)	Number of explants	Callus induction rate (%)
1	0.5	0	90	1.22±0.51 g
2	1.0	0	90	2.26±0.51 fg
3	2.0	0	90	3.00±0.62 f
4	0.5	1.0	90	82.48±1.08 b
5	1.0	1.0	90	69.08±0.63 c
6	2.0	1.0	90	25.19±1.19 e
7	0.5	2.0	90	93.37±1.07 a
8	1.0	2.0	90	81.26±1.14 b
9	2.0	2.0	90	31.63±0.56 d

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表3 6-BA和2,4-D组合对银扇草叶片外植体愈伤组织诱导的影响

正文中引用本图/表的段落

将叶片外植体接种于含不同浓度6-BA和2,4-D组合的愈伤组织诱导培养基(表3)。10天后, 银扇草叶片外植体稍微卷曲, 叶脉处开始出现愈伤组织, 每个叶片外植体上可诱导产生多个愈伤组织(图1A, B); 20天后, 支脉处的愈伤组织开始膨大, 接触培养基, 形成紧密的绿色愈伤组织, 其中部分出现轻微的褐化。结果表明, 以MS为基本培养基, 添加不同浓度6-BA和2,4-D组合均能诱导银扇草叶片外植体产生愈伤组织。当2,4-D浓度固定不变时, 随着6-BA浓度的升高愈伤组织诱导率下降; 当6-BA浓度低于2,4-D时, 愈伤组织诱导率较高, 均达80%以上, 在添加0.5 mg?L-1 6-BA和2.0 mg?L-1 2,4-D的培养基中愈伤组织诱导率最高, 达93.37%, 且生长状况较好。

相比6-BA和NAA组合, 6-BA和2,4-D组合诱导银扇草真叶产生愈伤组织的速度更快、质地更紧密, 更适合银扇草愈伤组织诱导。综上, 银扇草愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+0.5 mg?L-1 6-BA+2.0 mg?L-1 2,4-D, 愈伤组织诱导率达93.37% (表3)。

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