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银扇草再生体系的建立

曾浩, 李佩芳, 郭至辉, 刘春林, 阮颖

植物学报 2024, 59 (3): 433-440. DOI: 10.11983/CBB23094

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为建立银扇草(Lunaria annua)体外再生体系, 以其真叶为外植体, 探讨消毒条件、植物生长调节剂组合及浓度对愈伤组织诱导、不定芽和不定根分化的影响; 进一步分析了生根方式对成苗和幼苗生长的影响。结果表明, 用75%乙醇消毒45秒配合0.1%升汞溶液消毒6分钟为银扇草叶片外植体最佳消毒处理; 真叶愈伤组织诱导及不定芽分化的最适培养基为MS+0.5 mg∙L^-16-BA+2.0 mg∙L^-1 2,4-D, 愈伤组织诱导率达93.37%, 不定芽分化率达84.08%; 最佳生根培养基为MS+ 0.1 mg∙L^-1NAA, 从接种叶片外植体到获得再生植株约90天。该研究建立了银扇草稳定的再生体系, 为开发利用银扇草资源及挖掘功能基因奠定了基础。

Number	75% ethanol (s)	0.1% HgCl₂(min)	Number of explants	Contamination rate (%)	Survival rate (%)
1	45	8	69	0.90±0.79 c	3.01±0.44 c
2	45	6	96	13.10±0.79 b	86.70±1.29 b
3	45	4	75	47.33±1.15 a	98.88±0.96 a

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表1 氯化汞消毒时间对外植体消毒效果的影响

正文中引用本图/表的段落

将种子置于清水中浸泡4小时, 至其下沉。将浸泡充分的种子播种于培养钵中, 表面覆盖1层草木炭基质, 保持土壤湿润。待真叶长至7 cm × 11 cm后, 取真叶在流水下冲洗干净, 用75%乙醇消毒45秒, 无菌水冲洗3遍, 然后用0.1%升汞溶液分别消毒4、6和8分钟, 再用无菌水冲洗3遍。将消毒后的叶片切割成1 cm × 1 cm的小块, 接种至愈伤组织诱导培养基中。30天后统计外植体的存活率和污染率。

取7 cm × 11 cm银扇草真叶, 用75%乙醇和0.1%氯化汞溶液消毒, 可见叶片的主脉明显, 侧脉支脉多, 呈网状, 表面覆有白色绒毛。将消毒后的叶片切成1 cm × 1 cm的小块, 接种于愈伤组织诱导培养基中。培养30天后, 结果显示随着消毒时间的延长, 污染率逐渐降低; 但消毒时间过长会对外植体造成伤害, 使其存活率降低。用0.1%氯化汞溶液消毒4分钟, 存活率为98.88%, 但污染率高达47.33%; 消毒6分钟, 污染率为13.10%, 存活率达86.70%; 消毒8分钟, 污染率为0, 但存活率仅为3.01% (表1)。综合考虑外植体的污染率和存活率, 我们认为75%乙醇消毒45秒配合0.1%氯化汞溶液消毒6分钟为最佳处理。

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