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银扇草再生体系的建立

曾浩, 李佩芳, 郭至辉, 刘春林, 阮颖

植物学报 2024, 59 (3): 433-440. DOI: 10.11983/CBB23094

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为建立银扇草(Lunaria annua)体外再生体系, 以其真叶为外植体, 探讨消毒条件、植物生长调节剂组合及浓度对愈伤组织诱导、不定芽和不定根分化的影响; 进一步分析了生根方式对成苗和幼苗生长的影响。结果表明, 用75%乙醇消毒45秒配合0.1%升汞溶液消毒6分钟为银扇草叶片外植体最佳消毒处理; 真叶愈伤组织诱导及不定芽分化的最适培养基为MS+0.5 mg∙L^-16-BA+2.0 mg∙L^-1 2,4-D, 愈伤组织诱导率达93.37%, 不定芽分化率达84.08%; 最佳生根培养基为MS+ 0.1 mg∙L^-1NAA, 从接种叶片外植体到获得再生植株约90天。该研究建立了银扇草稳定的再生体系, 为开发利用银扇草资源及挖掘功能基因奠定了基础。

Number	6-BA (mg∙L^-1)	NAA (mg∙L^-1)	Number of explants	Callus induction rate (%)
1	0.5	0	90	0.67±0.67 g
2	1.0	0	90	1.22±1.17 g
3	2.0	0	90	2.22±0.51 g
4	0.5	1.0	90	40.89±2.14 d
5	1.0	1.0	90	75.60±1.06 b
6	2.0	1.0	90	52.00±0.78 c
7	0.5	2.0	90	32.74±0.56 f
8	1.0	2.0	90	78.04±1.20 a
9	2.0	2.0	90	35.52±0.83 e

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表2 6-BA和NAA组合对银扇草叶片外植体愈伤组织诱导的影响

正文中引用本图/表的段落

将切割成1 cm × 1 cm的叶片外植体接种于含不同浓度6-BA和NAA组合的愈伤组织诱导培养基(表2), 接种时叶片外植体背面朝下, 同时轻轻按压形态学下端, 使其与培养基充分接触。培养30天, 叶片外植体的支脉和侧脉处产生松散的白色愈伤组织, 生长较缓慢; 37天后, 愈伤组织颜色由白色变为浅绿色, 质地由松散变紧密。结果表明, 不同浓度6-BA和NAA组合对愈伤组织诱导率有明显影响。当培养基中NAA浓度为1.0 mg?L-1时, 随着6-BA浓度的升高愈伤组织诱导率从40.89%升至75.60%, 之后又降至52.00%。当培养基中NAA浓度为2.0 mg?L-1时, 随着6-BA浓度的升高愈伤组织诱导率从32.74%升至78.04%后又降至35.52%。当6-BA浓度为1.0 mg?L-1、NAA浓度为2.0 mg?L-1时, 诱导率达到最高值, 为78.04% (表2)。

将高2 cm的不定芽切掉底部的愈伤组织后转移至生根培养基中。15天后, 1号培养基(表5)中的不定芽底部开始出现白色根尖; 30天后, 根尖伸长且根的基部开始分化出新根, 此阶段不定芽持续生长, 形成组培苗(图1F)。2号培养基(表5)中的不定芽则在培养22天开始分化出根尖。结果表明, 在2种培养基中不定芽均能诱导出不定根, 但2号培养基中产生的不定根较细, 且平均根长和根数均低于1号培养基, 而1号培养基中的生根率较高, 达91.63% (表5)。综上, 银扇草最佳生根培养基为1号培养基MS+0.1 mg?L-1 NAA。

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