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大花银莲花愈伤组织诱导及再生体系的建立

逯锦春, 曹丽娜, 佟冠杰, 王鑫颖, 张利英, 喻锌, 李荟芳, 李彦慧

植物学报 2022, 57 (2): 217-226. DOI: 10.11983/CBB21200

摘要（1187）

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为建立野生大花银莲花(Anemone silvestris)组培再生体系, 分别以无菌苗上、下胚轴、叶片和叶柄为外植体, 探讨不同浓度植物生长调节剂对不同外植体的愈伤组织诱导、不定芽分化、增殖与生根的影响。结果表明, 4种外植体均可诱导出不定芽, 其中上胚轴诱导效果最佳, 其在1/2MS+2.0 mg∙L^-16-BA+0.1 mg∙L^-1NAA培养基中诱导率最高, 为86.67%; 最适增殖培养基为1/2MS+1.0 mg∙L^-16-BA+0.05 mg∙L^-1NAA, 增殖系数为3.67; 最佳生根培养基为1/2MS+0.3 mg∙L^-1IBA, 生根率为100%; 在草炭:蛭石=2:1 (v/v)的栽培基质中, 组培苗的移栽成活率最高, 为98.33%。该研究有效解决了野生大花银莲花在园林及药用生产上的种质资源紧缺难题, 为工厂化育苗提供了技术支撑。

No.	6-BA (mg∙L^-1)	NAA (mg∙L^-1)	Callus induction rate (%)	Budding rate (%)	Growth condition
1	0	0	0.00±0.00 d	0.00±0.00 f	-
2	0.5	0.1	86.67±6.01 ab	43.57±5.17 bc	++
3	0.5	0.2	93.33±4.41 ab	28.49±4.05 cd	+
4	0.5	0.5	71.67±4.41 bc	0.00±0.00 f	-
5	0.5	1.0	55.00±5.77 c	0.00±0.00 f	-
6	1.0	0.1	76.67±10.14 abc	0.00±0.00 f	-
7	1.0	0.2	83.33±4.41 ab	26.21±5.38 de	+
8	1.0	0.5	96.67±1.67 a	10.26±2.81 ef	+++
9	1.0	1.0	88.33±6.01 ab	0.00±0.00 f	-
10	2.0	0.1	100.00±0.00 a	76.67±4.41 a	++++
11	2.0	0.2	100.00±0.00 a	53.33±6.01 b	+++
12	2.0	0.5	93.33±4.41 ab	30.42±3.45 cd	++
13	2.0	1.0	100.00±0.00 a	0.00±0.00 f	-

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表2 不同植物生长调节剂处理对大花银莲花下胚轴愈伤组织诱导及不定芽分化的影响

正文中引用本图/表的段落

此外, 与CK相比, 不同处理对下胚轴愈伤组织诱导的影响显著(表2)。当6-BA浓度为0.5以及1.0 mg∙L-1时, 随着NAA浓度的升高, 愈伤组织的诱导率呈先上升后下降; 当6-BA浓度为2.0 mg∙L-1时, NAA浓度为0.1、0.2以及1.0 mg∙L-1时, 愈伤组织的诱导率均为100%, 但是在0.2 mg∙L-1 NAA处理下, 愈伤组织多为黄白色, 并且表面的芽点较少, 而在1.0 mg∙L-1 NAA处理下, 愈伤组织的水渍化较为严重。因此, 下胚轴愈伤组织诱导的最佳培养基为1/2MS+2.0 mg∙L-1 6-BA+0.1 mg∙L-1 NAA, 此时愈伤组织多呈黄绿色, 且生长较为致密, 有颗粒感(图1C)。

将下胚轴诱导出的长势相同的愈伤组织接种于含不同浓度激素的培养基中, 发现6-BA浓度一定时, 不定芽的诱导率随着NAA浓度的升高逐渐降低(表2)。6-BA浓度为2.0 mg∙L-1时, 不定芽的出芽率普遍较高。其中, 当NAA浓度为0.1 mg∙L-1时, 不定芽的出芽率最高, 为76.67%, 此时分化出的芽较绿且健壮。因此, 下胚轴不定芽诱导的最佳培养基为1/2MS+2.0 mg∙L-1 6-BA+0.1 mg∙L-1 NAA。

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