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大花银莲花愈伤组织诱导及再生体系的建立

逯锦春, 曹丽娜, 佟冠杰, 王鑫颖, 张利英, 喻锌, 李荟芳, 李彦慧

植物学报 2022, 57 (2): 217-226. DOI: 10.11983/CBB21200

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为建立野生大花银莲花(Anemone silvestris)组培再生体系, 分别以无菌苗上、下胚轴、叶片和叶柄为外植体, 探讨不同浓度植物生长调节剂对不同外植体的愈伤组织诱导、不定芽分化、增殖与生根的影响。结果表明, 4种外植体均可诱导出不定芽, 其中上胚轴诱导效果最佳, 其在1/2MS+2.0 mg∙L^-16-BA+0.1 mg∙L^-1NAA培养基中诱导率最高, 为86.67%; 最适增殖培养基为1/2MS+1.0 mg∙L^-16-BA+0.05 mg∙L^-1NAA, 增殖系数为3.67; 最佳生根培养基为1/2MS+0.3 mg∙L^-1IBA, 生根率为100%; 在草炭:蛭石=2:1 (v/v)的栽培基质中, 组培苗的移栽成活率最高, 为98.33%。该研究有效解决了野生大花银莲花在园林及药用生产上的种质资源紧缺难题, 为工厂化育苗提供了技术支撑。

No.	6-BA (mg∙L^-1)	NAA (mg∙L^-1)	Proliferation coefficient
No.	6-BA (mg∙L^-1)	NAA (mg∙L^-1)	Epicotyl	Hypocotyl	Leaf	Petiole
1	0	0	2.78±0.11 b	1.56±0.29 e	0.00±0.00 e	0.00±0.00 f
2	1	0.05	3.89±0.29 a	3.00±0.19 b	3.66±0.33 a	2.33±0.38 b
3	1.5	0.05	3.33±0.19 ab	1.78±0.22 de	2.44±0.11 bc	2.22±0.11 bc
4	2	0.05	2.13±0.11 cd	1.89±0.11 cde	1.47±0.11 d	2.44±0.13 b
5	4	0.05	1.78±0.30 d	1.55±0.23 e	1.44±0.12 d	2.12±0.29 bcd
6	1	0.1	3.11±0.11 b	2.44±0.12 bcd	2.44±0.11 bc	2.23±0.29 bc
7	1.5	0.1	1.89±0.29 d	2.66±0.30 bc	2.67±0.19 b	1.76±0.22 bcde
8	2	0.1	3.78±0.22 a	3.77±0.29 a	3.56±0.29 a	2.11±0.11 bcd
9	4	0.1	2.67±0.19 bc	2.55±0.11 bc	2.78±0.29 b	3.22±0.11 a
10	1	0.2	1.55±0.22 d	2.43±0.30 bcd	1.78±0.11 cd	1.22±0.22 e
11	1.5	0.2	2.00±0.18 d	2.55±0.12 bc	2.22±0.23 bc	1.44±0.12 de
12	2	0.2	3.00±0.19 b	2.58±0.11 bc	2.89±0.29 b	1.56±0.28 cde
13	4	0.2	1.67±0.17 d	2.45±0.22 bcd	2.66±0.33 b	1.89±0.29 bcde
Average			2.58±0.22 A	2.40±0.17 B	2.31±0.27 B	1.89±0.21 C

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表5 不同植物生长调节剂处理对大花银莲花不定芽增殖的影响

正文中引用本图/表的段落

将不同外植体分化出的不定芽及其基部携带的愈伤组织接种于增殖培养基中, 发现同种外植体在不同激素处理下不定芽的增殖差异显著, 4种外植体平均增殖系数依次为: 上胚轴(2.58) >下胚轴(2.40) >叶片(2.31) >叶柄(1.89) (表5)。在相同培养条件及处理时间下, 不同类型外植体不定芽增殖速度排序同其不定芽平均增殖系数。其中, 上胚轴与叶片在1.0 mg∙L-1 6-BA+0.05 mg∙L-1 NAA处理下的不定芽增殖系数最高, 分别为3.89与3.66; 下胚轴在2.0 mg∙L-1 6-BA+ 0.1 mg∙L-1 NAA处理下的不定芽增殖系数最高, 为3.77; 叶柄则在4.0 mg∙L-1 6-BA+0.1 mg∙L-1 NAA处理下的不定芽增殖系数最高, 为3.22。同一种外植体在不同浓度6-BA与NAA组合处理下, 不定芽的增殖系数不同。当NAA浓度一定时, 随着6-BA浓度的增加上胚轴与下胚轴不定芽的增殖系数先升高后降低; 当6-BA浓度一定时, 随着NAA浓度的增加叶片与叶柄不定芽的增殖系数呈整体降低趋势, 呈现出高浓度NAA抑制不定芽增殖现象。综合不定芽增殖系数和增殖速度, 以上胚轴在1.0 mg∙L-1 6-BA+0.05 mg∙L-1 NAA处理下的效果最佳, 30天内, 上胚轴不定芽的增殖系数最高, 达到3.89, 此时不定芽茎粗, 叶色鲜绿, 芽的整体高度最高(图1G)。

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