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大花银莲花愈伤组织诱导及再生体系的建立

逯锦春, 曹丽娜, 佟冠杰, 王鑫颖, 张利英, 喻锌, 李荟芳, 李彦慧

植物学报 2022, 57 (2): 217-226. DOI: 10.11983/CBB21200

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为建立野生大花银莲花(Anemone silvestris)组培再生体系, 分别以无菌苗上、下胚轴、叶片和叶柄为外植体, 探讨不同浓度植物生长调节剂对不同外植体的愈伤组织诱导、不定芽分化、增殖与生根的影响。结果表明, 4种外植体均可诱导出不定芽, 其中上胚轴诱导效果最佳, 其在1/2MS+2.0 mg∙L^-16-BA+0.1 mg∙L^-1NAA培养基中诱导率最高, 为86.67%; 最适增殖培养基为1/2MS+1.0 mg∙L^-16-BA+0.05 mg∙L^-1NAA, 增殖系数为3.67; 最佳生根培养基为1/2MS+0.3 mg∙L^-1IBA, 生根率为100%; 在草炭:蛭石=2:1 (v/v)的栽培基质中, 组培苗的移栽成活率最高, 为98.33%。该研究有效解决了野生大花银莲花在园林及药用生产上的种质资源紧缺难题, 为工厂化育苗提供了技术支撑。

No.	6-BA (mg∙L^-1)	NAA (mg∙L^-1)	Callus induction rate (%)		Growth condition
No.	6-BA (mg∙L^-1)	NAA (mg∙L^-1)	Leaf	Petiole	Leaf	Petiole
1	0	0	0.00±0.00 d	0.00±0.00 e	-	-
2	0.5	0.1	90.00±5.77 ab	93.33±3.33 abc	+	+
3	1.0	0.1	96.67±3.33 a	96.67±3.33 ab	++	+
4	2.0	0.1	100.00±0.00 a	100.00±0.00 a	+++++	+++++
5	4.0	0.1	80.00±5.77 bc	83.33±3.33 bcd	+	++
6	0.5	0.3	76.67±3.33 bc	80.00±5.77 cd	+++	++
7	1.0	0.3	80.00±0.00 bc	76.67±3.33 d	++	++
8	2.0	0.3	73.33±3.33 c	73.33±3.33 d	+++	+
9	4.0	0.3	76.67±3.33 bc	80.00±0.00 cd	+++	++
10	0.5	0.5	80.00±0.00 bc	73.33±3.33 d	++	+++
11	1.0	0.5	80.00±0.00 bc	80.00±0.00 cd	+++	++++
12	2.0	0.5	96.67±3.33 a	93.33±3.33 abc	++	+++
13	4.0	0.5	100.00±0.00 a	100.00±0.00 a	++++	+++

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表3 不同植物生长调节剂处理对大花银莲花叶片和叶柄愈伤组织诱导的影响

正文中引用本图/表的段落

激素种类及浓度对大花银莲花叶片和叶柄愈伤组织的诱导皆有一定影响, 添加不同激素的培养基中, 叶片受伤处均可诱导出愈伤组织(表3)。当6-BA浓度一定时, 随着NAA浓度的增加, 愈伤组织的诱导率呈先降低后上升; 当NAA浓度为0.1和0.3 mg∙L-1时, 随着6-BA浓度的升高, 愈伤组织的诱导率呈先上升后下降。在2.0 mg∙L-1 6-BA+0.1 mg∙L-1 NAA或4.0 mg∙L-1 6-BA+0.5 mg∙L-1 NAA处理下的愈伤组织诱导率最高, 均为100%, 但是前者处理下的愈伤组织生长速度较快, 培养的第1周叶片开始出现卷曲, 第2周伤口处开始膨大产生凸起, 第18天开始脱分化产生细小颗粒状的黄绿色愈伤组织, 1个月后表面出现质地紧密且具有芽点分布的愈伤组织。因此, 叶片愈伤组织的最佳诱导培养基为1/2MS+2.0 mg∙L-1 6-BA+0.1 mg∙L-1 NAA (图1D)。

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