|
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
星蕨体外快繁技术
植物学报
2025, 60 (6):
944-956.
DOI: 10.11983/CBB24190
为加强野生蕨类植物的保护与开发, 优化星蕨(Microsorum punctatum)孢子萌发方法和条件, 比较分析了不同因素对原叶体增殖、孢子体诱导、绿色球状小体(GGBs)诱导及其发育为幼孢子体的影响, 建立人工高效快繁技术体系。以成熟孢子为材料, 分别以MS、1/2MS、1/3MS和1/4MS为基本培养基在无菌条件下萌发; 通过L9(34)正交试验, 研究无机盐浓度、植物生长调节剂及其质量浓度对原叶体发生和增殖的影响。当原叶体增殖到一定数量时, 再以MS、1/2MS、1/3MS和1/4MS为基本培养基筛选适宜诱导孢子体的培养基; 随后, 以幼孢子体为材料诱导GGBs发育为新的幼孢子体并炼苗移栽。适宜孢子萌发的培养基为1/2MS, 原叶体在MS+0.3 mg·L-1 6-BA+1.5 mg·L-1 NAA培养基中大量增殖, 60天后增殖系数约为9.6; 将原叶体切割后接入1/4MS培养基, 加无菌水培养90天后, 幼孢子体发生系数约为10.0; 幼孢子体在1/2MS+1.5 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 NAA培养基中可诱导出GGBs, 诱导率达93.3%, GGBs在此培养基中的增殖系数达32.0; 在1/2MS培养基中GGBs的分化成苗率较高, 最高约为92%; 试管苗经炼苗移栽成活率在90%以上。该研究建立了原叶体-受精-孢子体和幼孢子体-GGBs-幼孢子体2个技术体系, 尤其是GGBs的产生, 极大缩短了植株的再生周期。研究结果可为优质种苗及其它蕨类植物的人工繁育提供技术支撑。
表5
不同植物生长调节剂浓度对绿色球状小体(GGBs)诱导和增殖的影响
正文中引用本图/表的段落
完全组合实验结果表明, 不同浓度的6-BA和NAA对GGBs的诱导有明显影响(表5), 较高浓度的6-BA和较低浓度的NAA组合对GGBs的诱导效果最佳, 结合GGBs的增殖情况, 得出适宜诱导GGBs的培养基为1/2MS+1.5 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 NAA。
诱导GGBs分化成苗的实验结果见图4, GGBs在1/2MS培养基上的分化成苗率较高。将GGBs在表5中的较适培养基中增殖培养后(图4I, J), 转接至1/2MS培养基中培养30天长出大量双叶幼孢子体(图4K), 最高分化成苗率约为92%, 部分GGBs褐化。因GGBs在转接过程中带有微小配子体, 转接后发现有配子体增殖现象。剔除原叶体后继续培养50天, 孢子体进一步增大(图4L), 叶片逐渐增多, 长势较好。孢子体经炼苗后, 将清洗干净的幼苗移栽至灭菌后的碎松树皮中, 保温(25°C)、保湿(60%-70%)培养60天, 成活率达90%以上(图4M-P)。
本文的其它图/表
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||