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星蕨体外快繁技术
植物学报
2025, 60 (6):
944-956.
DOI: 10.11983/CBB24190
为加强野生蕨类植物的保护与开发, 优化星蕨(Microsorum punctatum)孢子萌发方法和条件, 比较分析了不同因素对原叶体增殖、孢子体诱导、绿色球状小体(GGBs)诱导及其发育为幼孢子体的影响, 建立人工高效快繁技术体系。以成熟孢子为材料, 分别以MS、1/2MS、1/3MS和1/4MS为基本培养基在无菌条件下萌发; 通过L9(34)正交试验, 研究无机盐浓度、植物生长调节剂及其质量浓度对原叶体发生和增殖的影响。当原叶体增殖到一定数量时, 再以MS、1/2MS、1/3MS和1/4MS为基本培养基筛选适宜诱导孢子体的培养基; 随后, 以幼孢子体为材料诱导GGBs发育为新的幼孢子体并炼苗移栽。适宜孢子萌发的培养基为1/2MS, 原叶体在MS+0.3 mg·L-1 6-BA+1.5 mg·L-1 NAA培养基中大量增殖, 60天后增殖系数约为9.6; 将原叶体切割后接入1/4MS培养基, 加无菌水培养90天后, 幼孢子体发生系数约为10.0; 幼孢子体在1/2MS+1.5 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 NAA培养基中可诱导出GGBs, 诱导率达93.3%, GGBs在此培养基中的增殖系数达32.0; 在1/2MS培养基中GGBs的分化成苗率较高, 最高约为92%; 试管苗经炼苗移栽成活率在90%以上。该研究建立了原叶体-受精-孢子体和幼孢子体-GGBs-幼孢子体2个技术体系, 尤其是GGBs的产生, 极大缩短了植株的再生周期。研究结果可为优质种苗及其它蕨类植物的人工繁育提供技术支撑。
表4
不同培养基类型对原叶体重量增加的影响
正文中引用本图/表的段落
本研究同时对添加0.3 mg·L-1 6-BA+1.5 mg·L-1 NAA的不同基本培养基类型进行原叶体团转接前后的重量对比, 结果与正交试验类似, MS培养基的增殖效果最佳, 增殖系数可达9.81。进一步证实基本培养基类型对原叶体增殖具关键作用, 同时也说明原叶体重量与增殖系数呈正相关(表4)。
将配子体中诱导出的孢子体(图4A)转接入上述培养基中培养60天后, 在孢子体基部根状茎幼嫩表皮上出现不易分离的绿色球状小体团(图4B, C), 分离后将其转入新的上述最适培养基中进行增殖培养; 30天后绿色球状小体分化为GGBs聚合体(图4D, E), 其表面长出单叶的细密球状小体即为GGBs (图4F); 将分开的单个GGB继续培养, 逐渐分化出幼孢子体(图4G, H)。
本文的其它图/表
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