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茶树茎段不定芽高效发生体系的建立

任露露, 张有泽, 黄克林, 宛晓春, 张照亮, 朱木兰, 韦朝领

植物学报 2023, 58 (2): 308-315. DOI: 10.11983/CBB22184

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茶树(Camellia sinensis)是重要的经济作物, 杂合度高且变异度大, 其高效离体再生体系鲜见报道。以舒茶早茎段为起始外植体, 进行不定芽高效发生影响因子研究。结果表明, MS+2 mg∙L^-1 6-BA为定芽诱导的最适配方, 定芽诱导率为84.44%, 吸收底盘膨大率为80%, 利于后续不定芽诱导; MS+2 mg∙L^-1 6-BA+0.2 mg∙L^-1 NAA+0.1 mg∙L^-1 KT+1 mg∙L^-1脯氨酸为不定芽增殖诱导的适宜配方, 不定芽诱导率为88.89%, 平均芽数为7.8。不定根诱导的适宜配方为1/2MS+3 mg∙L^-1 IBA, 生根率为85.56%。采用RAPD和ISSR技术对再生植株进行分子检测, 在连续2代离体再生植株中未发现明显变异。

Number	6-BA (mg?L^-1)	NAA (mg?L^-1)	Adventitious bud elongation rate (%)
1	0.2	0.02	24.44±6.94 c
2	0.4	0.04	30.00±3.33 c
3	0.6	0.06	58.89±1.92 b
4	0.8	0.08	70.00±8.82 a
5	1	0.1	51.11±5.09 b

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表4 植物生长调节剂对不定芽伸长的影响

正文中引用本图/表的段落

将带定芽的舒茶早茎段分别接种在含0-3 mg?L-1 6-BA、0-0.3 mg?L-1 NAA、0.1 mg?L-1 KT和1 mg?L-1脯氨酸的MS培养基中, 进行不定芽增殖诱导。结果表明, 培养4周后, 不定芽陆续被诱导产生。随着6-BA和NAA浓度的增高, 不定芽诱导率和平均不定芽数先升高后下降; 当不添加6-BA和NAA时, 不定芽诱导数量较少; 当添加1 mg?L-1 6-BA和0.1 mg?L-1 NAA时, 平均仅形成1个不定芽, 且叶片瘦小卷曲; 添加2 mg?L-1 6-BA和0.2 mg?L-1 NAA时, 不定芽诱导效果最佳, 诱导率为88.89%, 平均不定芽数为7.88个, 芽苗呈绿色, 叶片舒展(图1C); 当6-BA和NAA的浓度分别为3 mg?L-1和0.3 mg?L-1时, 不定芽诱导率为71.11%, 平均不定芽数仅为3-4个, 且底部出现大量愈伤组织, 不定芽叶片较黄(表3)。因此, 茎段诱导不定芽的较佳配方为MS+2 mg?L-1 6-BA+0.2 mg?L-1 NAA。

将诱导出的不定芽转接到含6-BA (浓度分别为0.2、0.4、0.6、0.8和1.0 mg?L-1)和NAA (浓度分别为0.02、0.04、0.06、0.08和0.1 mg?L-1)的MS培养基中, 进行不定芽伸长培养。结果表明, 不同植物生长调节剂组合均能诱导不定芽伸长, 但不定芽伸长状态存在差异(表4)。当6-BA浓度为0.8 mg?L-1、NAA浓度为0.08 mg?L-1时, 不定芽伸长率最高, 为70% (图1D), 其次是0.6 mg?L-1 6-BA和0.06 mg?L-1 NAA组合, 不定芽伸长率达58.89%。

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