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樟叶越桔细胞悬浮培养条件的优化
植物学报
2022, 57 (2):
227-235.
DOI: 10.11983/CBB21069
为了提高樟叶越桔(Vaccinium dunalianum)悬浮培养细胞的生物量, 以樟叶越桔叶片愈伤组织为试材, 通过单因素试验探究不同蔗糖浓度、培养基pH值、培养基体积、初始接种量和摇床转速对悬浮培养细胞生长的影响, 并根据响应面法Box-Behnken试验设计原理进行组合试验以优化培养条件。结果显示, 以改良WPM培养基为基础培养基, 樟叶越桔细胞悬浮培养的最优条件为40 g·L-1蔗糖、培养基pH5.2、培养基体积45 mL、初始接种量2.64 g和摇床转速为149 r·min-1, 其细胞生物量干重为0.184 4 g, 与理论预测值0.184 5 g较为接近, 且细胞的生长曲线呈S型。研究结果为樟叶越桔悬浮培养细胞次生代谢产物的生产调控奠定了技术基础。  View image in article
图3
樟叶越桔细胞悬浮培养体系生物量及细胞活力变化曲线
不同小写字母表示各处理间差异显著(P<0.05)。
正文中引用本图/表的段落
在最优培养条件下建立樟叶越桔细胞悬浮培养体系, 培养周期为24天, 绘制悬浮细胞的生长曲线, 并辅以细胞活力来分析悬浮培养细胞的生长动态变化(图3)。结果表明, 樟叶越桔悬浮培养细胞的生长曲线基本呈S型, 在培养初期的0-3天内细胞处于生长滞后期, 生物量略有下降, 细胞活力较低; 培养6-15天细胞进入生长对数期, 生物量增加, 细胞活力也逐步上升; 15- 18天生物量增速变缓, 并在18天达到最大(0.184 4 g), 随后生物量变化不明显, 细胞活力在15天达到最大值后逐渐降低, 其原因可能是由于培养后期培养液中的营养不足以支持细胞的生长, 导致生物量和细胞活力下降。综合分析细胞活力与生物量的变化, 确定15天为樟叶越桔细胞悬浮培养体系的最佳培养周期。
本文的其它图/表
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