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樟叶越桔细胞悬浮培养条件的优化
植物学报
2022, 57 (2):
227-235.
DOI: 10.11983/CBB21069
为了提高樟叶越桔(Vaccinium dunalianum)悬浮培养细胞的生物量, 以樟叶越桔叶片愈伤组织为试材, 通过单因素试验探究不同蔗糖浓度、培养基pH值、培养基体积、初始接种量和摇床转速对悬浮培养细胞生长的影响, 并根据响应面法Box-Behnken试验设计原理进行组合试验以优化培养条件。结果显示, 以改良WPM培养基为基础培养基, 樟叶越桔细胞悬浮培养的最优条件为40 g·L-1蔗糖、培养基pH5.2、培养基体积45 mL、初始接种量2.64 g和摇床转速为149 r·min-1, 其细胞生物量干重为0.184 4 g, 与理论预测值0.184 5 g较为接近, 且细胞的生长曲线呈S型。研究结果为樟叶越桔悬浮培养细胞次生代谢产物的生产调控奠定了技术基础。  View image in article
图2
两因素交互作用对樟叶越桔悬浮培养细胞生物量影响的3D响应面分析
(A) 蔗糖浓度和pH值; (B) 蔗糖浓度和培养基体积; (C) 蔗糖浓度和初始接种量; (D) 蔗糖浓度和摇床转速; (E) pH值和培养基体积; (F) pH值和初始接种量; (G) pH值和摇床转速; (H) 培养基体积和初始接种量; (I) 培养基体积和摇床转速; (J) 初始接种量和摇床转速
正文中引用本图/表的段落
运用Design-Expert V12.0.3.3软件对各因素交互作用进行分析, 并绘制樟叶越桔悬浮培养条件的两因素响应面3D图(图2)。响应面曲面的陡峭程度可反映出两因素交互作用对生物量积累的影响程度, 曲面越陡峭说明两因素的交互作用对樟叶越桔悬浮培养细胞生物量的影响越大; 相反, 曲面越平缓则说明两因素的交互作用对生物量的影响越小。从图2A-J可知, 两因素响应面的曲面陡峭程度依次是AC>CD> BC>AD>BD>AB>AE>DE>BE>CE, 即蔗糖浓度和培养基体积两因素的交互作用对生物量的影响最大, 培养基体积和摇床转速的交互作用对生物量的影响最小, 这一结果也与表3的方差分析结果相符。
本文的其它图/表
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