图/表详细信息

大花三色堇再生体系建立

张汝鑫, 李晨荣, 王童欣, 黎洁, 李霆格, 许慧娴, 李梅儿, 赵莹, 彭婷, 王健

植物学报 2025, 60 (6): 968-977. DOI: 10.11983/CBB24164

摘要（547）

HTML （101）

PDF（pc）（1300KB）（996）

为建立大花三色堇(Viola × wittrockiana)植株再生体系, 以其8个品种的叶片和叶柄为实验材料, 筛选并确定了再生率高的品种和部位。结果表明, PXP是供试品种中用于大花三色堇再生体系建立的最佳品种, 其叶柄是最佳外植体。以品种PXP的叶柄为外植体, 进行再生体系优化。结果表明, 愈伤组织诱导最适培养基为1/2MS (不含糖)+30 g∙L^-1蔗糖+1.5 mg∙L^-12,4-D+1.5 mg∙L^-1 KT, 不定芽诱导最优培养基为1/2MS (不含糖)+30 g∙L^-1海藻糖+0.05 mg∙L^-12,4-D+3 mg∙L^-16-BA, 再生苗经多次诱导分化, 再生率可达(67.33±3.06)%。不定芽增殖最优培养基为MS (不含糖)+30 g∙L^-1海藻糖+0.5 mg∙L^-12,4-D+1 mg∙L^-16-BA, 增殖系数为3.29±0.22。再生苗在配方为1/2MS (不含糖)+30 g∙L^-1海藻糖+0.1 mg∙L^-1NAA的生根培养基上培养2周后开始生根, 生根率为(84.44±6.93)%。该研究建立了分化率较高的大花三色堇再生体系, 解决了大花三色堇不定芽分化困难的难题, 为其育种改良和优良品种快繁提供了技术支持。

Type	Callus formation rate (%)	Callus growth state	Differentiation rate (%)
Y1 (1/2MS (sugar-free)+30 g∙L^-1 sucrose+1.5 mg∙L^-1 2,4-D+0.5 mg∙L^-1 NAA+3.0 mg∙L^-1 GA₃)	93.56±1.16 a	Pale yellow, loose, softer texture, fast growth	10.37±1.28 b
Y2 (1/2MS (sugar-free)+30 g∙L^-1 sucrose+1.5 mg∙L^-1 2,4-D+1.5 mg∙L^-1 KT)	95.67±3.47 a	Yellow, dense, somewhat hard texture, slow growth	18.52±1.28 a

View table in article

表2 不同培养基对PXP分化率的影响

正文中引用本图/表的段落

将PXP的叶柄接种于Y1和Y2培养基上。15天后, Y2培养基上的叶柄切口处开始出现愈伤组织。在后期培养中, 与Y1培养基相比, Y2培养基上的愈伤组织生长更旺盛, 诱导的愈伤组织呈现出更明显的黄绿色且质地更为紧密; 而Y1培养基上的愈伤组织则偏白且松软。根据前期的品种筛选结果, 黄绿色的愈伤组织更易分化出不定芽, 后期的分化培养结果也证实了这一点。Y2培养基上诱导的愈伤组织分化率达(18.52± 1.28)%, 而Y1培养基上诱导的愈伤组织分化率仅为(10.37±1.28)%。综上, 确定Y2培养基为后续愈伤组织诱导培养基(表2)。

以Y2培养基诱导的PXP叶柄愈伤组织为实验材料, 进行分化培养基优化。结果表明, 4号实验组愈伤组织分化率(26.67%)最高, 1号和3号实验组愈伤组织分化率(8.33%)最低(表3)。依据均值大小可判断不同水平处理对分化率的影响。通过计算得出KA2>KA3> KA1、KB2>KB1>KB3、KC3>KC2=KC1, 经判断得出A2为A因素的最优水平, B2为B因素的最优水平, C3为C因素的最优水平, 综合判断A2B2C3为最优水平组合。当以PXP叶柄为外植体时, 最佳分化培养基为1/2MS (不含糖)+30 g?L-1海藻糖+0.01 mg?L-1 2,4-D+3 mg?L-1 6-BA。通过计算极差(R)可得出3因素对分化率的影响主次顺序为A>C>B, 即影响分化率的因素从大到小依次为糖源种类、6-BA浓度和2,4-D浓度。方差分析表明, 糖源种类对分化率的影响具有显著的统计学意义, P值为0.017 (P<0.05), 表明糖源种类对实验结果有显著影响。相比之下, 2,4-D浓度和6-BA浓度的P值分别为0.25和0.2, 说明这2个因素在本实验条件下对结果无显著影响。综上所述, 糖源种类显著影响愈伤组织分化。添加不同种类糖源导致分化率差异显著, 而6-BA浓度和2,4-D浓度对愈伤组织分化影响不显著。取生长状态基本一致的愈伤组织接种于A2B2C3培养基上并验证分化效果, 结果分化率为(27.33±3.06)%, 优于各正交试验处理组, 说明A2B2C3为最适分化培养基。

本文的其它图/表