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文冠果种仁不定芽诱导及褐化抑制

周立茹, 敖妍, 仲静

植物学报 2025, 60 (6): 957-967. DOI: 10.11983/CBB24176

摘要（556）

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以文冠果(Xanthoceras sorbifolium)种仁为实验材料, 筛选诱导不定芽的最佳培养基并探究外植体褐化的影响因素。结果表明, 种仁消毒最佳方法为用75%乙醇消毒30秒, 再用0.1%有效氯消毒10分钟, 污染率为29.33%, 死亡率为12%。不定芽诱导最佳培养基为MS+2.5 mg∙L^-16-BA+1.0 mg∙L^-1NAA+30 g∙L^-1蔗糖+6.8 g∙L^-1琼脂+0.1 g∙L^-1肌醇, 诱导率为72.22%; 在不同细胞分裂素类植物生长调节剂中, 添加6-BA时, 外植体死亡率最低, 为12.50%, 诱导率最高, 为73.61%。温度26°C和光照强度19.5 µmol∙m^-2∙s^-1为最佳培养条件, 诱导率最高, 为72.22%。VI时期(7月1日至8日采种)的种仁饱满坚实, 种皮呈白色, 易剥离, 为抑制文冠果组培褐化的最佳培养材料, 不定芽诱导率最高, 为97.22%。

Group	Chorine disinfection time (min)	Effective chorine concentration (%)	Browning rate (%)	Death rate (%)	Contamination rate (%)
A1	10	0.1	22.67±3.53 d	12.00±2.31 e	29.33±3.53 a
A2	10	0.5	42.67±3.53 c	12.00±2.31 e	28.00±2.31 a
A3	10	1.0	62.60±1.33 b	34.67±3.53 c	21.33±3.53 ab
A4	10	5.0	42.67±3.53 c	25.33±1.33 d	9.33±3.53 cd
A5	20	0.1	60.00±6.93 b	18.67±3.53 de	21.33±3.53 ab
A6	20	0.5	61.33±3.53 b	52.00±4.62 b	16.00±2.31 bc
A7	20	1.0	62.67±4.81 b	45.33±3.53 b	4.00±2.31 d
A8	20	5.0	80.00±4.62 a	66.67±1.33 a	1.33±1.33 d

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表1 不同消毒处理对文冠果成熟种仁消毒效果的影响

正文中引用本图/表的段落

成熟种仁外植体消毒处理结果表明, 用含0.1% (A1)和0.5% (A2)有效氯的次氯酸钠溶液处理10分钟, 种仁死亡率为12%, 显著低于A6-A8、A3和A5等处理; 用含5%有效氯的次氯酸钠溶液消毒20分钟(A8), 污染率为1.33%, 显著低于A1-A6处理(表1)。文冠果种仁发生褐化后虽仍能诱导出不定芽, 但不定芽长势较差, 综合考虑种仁消毒后的整体健康情况, 在优先保证种仁存活与健康程度最大化的前提下, 选择污染率低的处理方法。A1与A2处理种仁的健康状况优于其它处理, A1处理褐化率(22.67%)显著低于A2处理(42.67%), 而二者的污染率差异不显著。因此, A1处理能够更好地保证种仁的存活和后续健康生长。综上, 用75%乙醇消毒30秒搭配0.1%有效氯消毒10分钟为文冠果成熟种仁最佳消毒方案。

文冠果种仁生长过程可分为9个时期(图4)。I-III期(6月3日-17日采种): 果皮呈绿色, 种皮脆弱、呈白色, 种仁细弱微小, 2片子叶为长条形, 嫩绿色, 种仁内含物为液态且透明。接种后种仁变化不明显, 脱分化率低, 与培养基接触的内含物部分变灰, 组培效果不佳(1-C₃">图4A₁-C₃)。IV期(6月24日采种): 果皮呈绿色, 种皮白色柔软, 易剥离, 种仁饱满, 内含物减少, 表面光滑且略带黏腻, 将种仁接种到空白培养基上, 胚根和胚芽可伸长, 为实生苗生长过程(1-D₃">图4D₁-D₃)。V期(7月1日采种): 与IV期相比, 种皮和果皮形态无明显变化, 种仁饱满, 呈白色, 液态内含物消失(图4E₁-E₃)。VI期(7月8日采种): 种皮部分变为黑红色, 颜色不均匀, 易剥离, 种仁饱满, 呈白色(1-F₃">图4F₁-F₃)。VII期(7月15日采种): 果皮开裂, 仍呈绿色, 种皮颜色加深, 硬度变大, 种仁饱满坚实(1-G₃">图4G₁-G₃)。VIII期(7月22日采种): 果皮开裂程度加大, 裂开的部分呈褐色, 种皮变硬, 种脐附近变黑, 其余为深红色, 种仁饱满, 中间变硬, 颜色变为浅黄色(1-H₃">图4H₁-H₃)。IX期(7月28日采种): 种仁成熟, 果皮完全开裂, 种皮完全变为黑色, 坚硬, 不易剥离, 种仁为浅黄色, 饱满, 可采收(1-I₃">图4I₁-I₃)。

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