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基于正交实验的赤苍藤组培快繁体系建立
张尚文, 黄诗宇, 杨天为, 李婷, 张向军, 高曼熔
植物学报    2024, 59 (1): 99-109.   DOI: 10.11983/CBB23040
摘要   (474 HTML21 PDF(pc) (1493KB)(1371)  

以赤苍藤(Erythropalum scandens)带芽点的半木质化枝条为材料建立赤苍藤组培快繁体系, 研究外植体灭菌条件, 通过正交实验, 设计不同植物生长调节剂组合对赤苍藤愈伤组织诱导、愈伤组织分化、生根壮苗及移栽驯化的影响。结果表明, 赤苍藤外植体消毒最佳方法是以体积浓度为75%乙醇浸泡60秒后, 再以质量浓度为0.1% HgCl2消毒10分钟, 成功率为48.89%; 叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+0.5 mg·L-1 6-BA+1.0 mg·L-1 2,4-D+1.0 mg·L-1 IBA, 培养30天, 诱导率达71.11%, 且绿色紧密; 茎段诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+1.0 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 2,4-D+1.0 mg·L-1 IBA, 培养30天, 诱导率为70.00%, 且绿色紧密; 诱导愈伤组织增殖以及分化的最佳培养基为MS+2.0 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 TDZ+1.0 mg·L-1 IBA, 芽分化率达98.89%, 增殖系数为3.33; 生根最佳培养基为MS+1.5 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 IBA, 生根率为100%, 平均生根数为2.2条; 生根苗在小颗粒泥炭土中成活率达88.89%。该研究建立了赤苍藤组培快繁体系, 为赤苍藤优质种苗生产奠定了良好基础。


Mass concentration (mg·L-1) Callus differentiation rate (%) Callus condition
6-BA TDZ 6-BA TDZ
0.1 4.44±1.92 ef 2.22±1.92 de No change Light green, 0-1 buds
0.2 6.67±3.33 e 10.00±5.77 e No change Light green, 0-1 buds
0.6 27.78±1.92 c 47.78±6.94 d Light green Light green, 0-2 buds
1.0 54.44±3.85 a 18.89±3.85 b Light green, 1-2 buds Light green, 0-3 buds
1.5 35.56±3.85 b 10.00±5.77 c Light green, 1-2 buds Light green,1-3 buds
2.0 23.33±5.77 cd 68.89±5.09 d Light green, 2-3 buds Partial albinism, 0-4 buds
2.5 18.89±3.85 d 68.89±1.92 a Albinism, 3-6 buds All albinism
3.0 3.33±3.33 ef 2.22±3.85 a Albinism, 3-6 buds Albinism
3.5 3.33±3.33 ef 0.00±0.00 e Death Death
4.0 0.00±0.00 f 0.00±0.00 e Death Death
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表6 不同浓度6-BA和TDZ诱导赤苍藤愈伤组织的分化率
正文中引用本图/表的段落
在MS培养基中添加单一细胞分裂素(6-BA/TDZ)对赤苍藤愈伤组织进行芽分化培养, 结果见表6。6-BA和TDZ均可以诱导愈伤组织的分化。添加细胞分裂素(6-BA/TDZ)约7天, 乳白色的愈伤组织表面开始变为淡绿色。15天左右, 淡绿色的愈伤组织表面出现高约1 mm的芽点, 但是不能长成正常的苗。较高浓度的6-BA (0.6-1.5 mg·L-1)诱导分化的芽数量较多且形态正常; 低浓度TDZ (0.1-1.5 mg·L-1)可以诱导芽分化, 但过高浓度的TDZ容易引起分化苗变异, 形成白化苗。总体上看, TDZ诱导愈伤组织分化芽的能力高于6-BA; 但二者浓度过高均会导致愈伤组织死亡。
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