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基于正交实验的赤苍藤组培快繁体系建立

张尚文, 黄诗宇, 杨天为, 李婷, 张向军, 高曼熔

植物学报 2024, 59 (1): 99-109. DOI: 10.11983/CBB23040

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以赤苍藤(Erythropalum scandens)带芽点的半木质化枝条为材料建立赤苍藤组培快繁体系, 研究外植体灭菌条件, 通过正交实验, 设计不同植物生长调节剂组合对赤苍藤愈伤组织诱导、愈伤组织分化、生根壮苗及移栽驯化的影响。结果表明, 赤苍藤外植体消毒最佳方法是以体积浓度为75%乙醇浸泡60秒后, 再以质量浓度为0.1% HgCl₂消毒10分钟, 成功率为48.89%; 叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+0.5 mg·L^-16-BA+1.0 mg·L^-12,4-D+1.0 mg·L^-1 IBA, 培养30天, 诱导率达71.11%, 且绿色紧密; 茎段诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+1.0 mg·L^-16-BA+0.5 mg·L^-12,4-D+1.0 mg·L^-1IBA, 培养30天, 诱导率为70.00%, 且绿色紧密; 诱导愈伤组织增殖以及分化的最佳培养基为MS+2.0 mg·L^-16-BA+0.5 mg·L^-1TDZ+1.0 mg·L^-1 IBA, 芽分化率达98.89%, 增殖系数为3.33; 生根最佳培养基为MS+1.5 mg·L^-16-BA+0.5 mg·L^-1IBA, 生根率为100%, 平均生根数为2.2条; 生根苗在小颗粒泥炭土中成活率达88.89%。该研究建立了赤苍藤组培快繁体系, 为赤苍藤优质种苗生产奠定了良好基础。

Plant growth regulator	Mass concentration (mg·L^-1)	Callus induction rate (%)		Callus condition
Plant growth regulator	Mass concentration (mg·L^-1)	Leaf	Shoot	Callus condition
IBA	0.1	13.33±5.77 b	18.89±1.92 b	Milky white, translucent
	0.2	33.33±6.67 a	22.22±5.09 b	Milky white, translucent
	0.4	28.89±3.85 a	38.89±3.85 a	Milky white, translucent
	0.6	28.89±1.92 a	36.67±5.77 a	Milky white, translucent
	0.8	20.00±3.33 b	35.56±8.39 a	Milky white, translucent
	1.0	5.56±1.92 d	4.44±1.92 cd	Milky white, translucent
	1.5	5.56±1.92 d	8.89±1.92 c	Milky white, translucent
	2.0	3.33±3.33 d	1.11±1.92 d	Milky white, translucent
	2.5	0.00±0.00 d	1.11±1.92 d	Stop growing
	3.0	0.00±0.00 d	0.00±0.00 d	Stop growing
2,4-D	0.1	20.00±5.77 c	17.78±1.92 d	Milky white, translucent
	0.2	22.22±6.94 c	22.22±3.85 cd	Milky white, translucent
	0.4	42.22±8.39 b	25.56±5.09 cd	Milky white, translucent
	0.6	47.78±3.85 b	28.89±3.85 c	Milky white, translucent
	0.8	42.22±3.85 b	38.89±9.62 b	Milky white, translucent
	1.0	48.89±8.39 b	45.56±5.09 b	Milky white, translucent
	1.5	27.78±1.92 c	38.89±1.92 b	Milky white, translucent
	2.0	75.56±6.94 a	28.89±3.85 c	Albinism, variation
	2.5	67.78±7.70 a	61.11±3.85 a	Albinism, variation
	3.0	1.11±1.92 d	5.56±9.62 e	Albinism, variation

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表5 不同浓度IBA和2,4-D处理赤苍藤初代苗叶片及茎段的愈伤组织诱导率

正文中引用本图/表的段落

分别将初代苗的叶片和茎段接入含有不同浓度梯度的单一生长调节剂MS培养基, 结果见表5。培养7天, 切口处开始出现卷曲、膨大; 培养30天, 愈伤组织不再继续膨大。不同浓度生长调节剂诱导愈伤组织的效果差异显著, 叶片在低浓度IBA (0.1-0.6 mg·L-1)或2,4-D (0.1-0.8 mg·L-1)下愈伤组织诱导效果较好。随着生长调节剂浓度的升高, 诱导率下降, 当IBA浓度达到2.5 mg·L-1后, 叶片脱落死亡; 茎段诱导愈伤组织所需的生长调节剂浓度比叶片稍高, 在IBA浓度为0.2-1.0 mg·L-1或2,4-D浓度为0.1-1.5 mg·L-1时诱导率较高。总体上看, 2,4-D相较于IBA诱导愈伤组织的浓度范围更宽, 但需要注意的是, 高浓度2,4-D (2.0 mg·L-1)诱导的愈伤组织松散且呈水渍状, 不能诱导成植株。因此, 从实际诱导效果看, IBA优于2,4-D。

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