植物学报 ›› 2008, Vol. 25 ›› Issue (01): 41-49.
郭蓓1, 2, 胡磊1, 何欣2, 陈雪梅1* , 蒋湘宁1
Bei Guo1, 2, Lei Hu1, Xin He2, Xuemei Chen1*, Xiangning Jiang1
摘要: 海藻糖-6-磷酸合成酶(trehalose-6-phosphate synthase, TPS)是海藻糖合成途径中的一个关键酶, 近些年来受到广泛关注, 以往的研究多数集中于细菌和真菌等, 而对植物体内TPS基因的研究较少。为此, 我们首先通过RT-PCR(reverse transcription PCR)克隆得到了拟南芥的TPS基因, 进而将其构建到原核高效表达载体pET30a(+)上并在大肠杆菌BL21中进行高效诱导表达。在确认该基因能够在体外正常表达之后, 将其构建到植物表达载体上并转入烟草体内, 通过实时荧光定量PCR检测, 证明在转基因个体中目的基因已经在受体基因组上完成整合, 并且在其中的2个个体中实现了正常转录。在对目标个体进行海藻糖含量的测定以及抗逆性实验后发现, S5个体具有良好的表现, 其体内海藻糖的含量明显高于其它个体, 并具有较强的耐受盐胁迫的能力。