%A 胡添源, 王睿, 陈上, 马宝伟, 高伟, 黄璐琦 %T 雷公藤悬浮细胞原生质体的制备及瞬时转化体系的建立 %0 Journal Article %D 2017 %J 植物学报 %R 10.11983/CBB16171 %P 774-782 %V 52 %N 6 %U {https://www.chinbullbotany.com/CN/abstract/article_3202.shtml} %8 2017-11-01 %X

为探索药用植物雷公藤(Tripterygium wilfordii)悬浮细胞原生质体提取的最优条件, 并建立雷公藤原生质体瞬时转化体系, 以雷公藤悬浮细胞为材料, 对酶解液配比、酶解时间、甘露醇浓度及处理转速进行考察。用PEG介导的瞬时转化法将外源基因转化到雷公藤原生质体中。结果表明, 以雷公藤悬浮细胞为材料提取原生质体的最佳条件是酶液配比为2.0%纤维素酶+0.5%果胶酶+0.5%离析酶, 甘露醇浓度为0.6 mol?L-1, 酶解10小时, 处理转速为67×g; 用PEG介导法将含有编码GFP的植物表达载体转化雷公藤悬浮细胞原生质体, 激光共聚焦扫描显微镜下细胞显示绿色荧光。通过实验筛选得到雷公藤悬浮细胞原生质体的最佳提取条件, 建立了雷公藤悬浮细胞原生质体的瞬时转化体系, 为进一步开展雷公藤功能基因及合成生物学研究奠定了基础。